J Clin Invest：阐明USP9X去泛素化ALDH1A3并维持GCSs的间充质特性

增生母细胞会瘤（GBM）是最常见和破坏适度的人脑恶适度，其相似性在于广泛的内异质适度。尽管不太可能在多方式将而疗法各个方面取得了的发展，但GBM病人的结果无论如何令人沮丧。GBM拥有一个细胞会亚群，称为GBM肿瘤细胞会（GSCs），具备自我系统升级活适度和多向分解构潜力以及起始技能。因此，迫切需要探索针对GSC的取而代之疗法策略。并且，醛脱氢酶（ALDH）超家族包含19种酶，它们将内源和外源醛代谢转成也就是说的羧酸。ALDH1A3是主要的ALDH同工酶，加入人细胞分裂会的各种认知过程。越来越多的证据声称，ALDH1A3在前列腺癌肿瘤细胞会（CSCs）当中表现出高活适度，并并不需要影响这些细胞会内的各种生物学相似性。在GBM当中，已找到ALDH1A3作为延续数间充质（MES）GSC的自我系统升级和致瘤适度的不可或缺分子。然而，MES GSCs当中ALDH1A3痉挛的机制无论如何是神秘的。2019年4月8日，南京医科大学第一附属医院王慧博一个团队等人在The Journal of Clinical Investigation上发表题为“USP9X deubiquitinates ALDH1A3and maintains mesenchymal identity in glioblastoma stem cells”的发表文章，找到USP9X是一种真正的DUB，可恒定ALDH1A3多NAD解构和稳定解构。并且，USP9X是预测ALDH1A3hi MES GSCs硫解构物的不可或缺分子，是MES GSCs自我系统升级和致瘤适度所并不需要的。同时还评量了USP9X诱发对病人；也的MES GSC异种GameCube三维的潜在治果。为了明确ALDH1A3蛋白究竟被NAD - 酪氨酸系统（UPS）译文后控制，研究课题医务人员首先应用于放线菌酮（CHX）抑制蛋白质从头合转成并HEK293T细胞会和正常人星形增生细胞会（NHAs）当中的ALDH1A3蛋白质水平。实际上，ALDH1A3在CHX处理事件的8小时内逐渐甲醛并完全检测不到。此外，用酪氨酸诱发剂MG-132处理事件细胞会造成ALDH1A3蛋白水平除此以外增加。这些数据声称ALDH1A3通过UPS甲醛。接下来，研究课题医务人员设法比对负责ALDH1A3稳定解构的潜在DUB，并应用于靶向HEK293T细胞会当中的98DUB的siGENOMERTF文库进行RNAi筛选。该研究课题初始筛选比对了与ALDH1A3传达系统性的4个DUB（USP3，USP9X，USP22和OTUD1）。当这些DUB与HEK293细胞会当中的ALDH1A3共传达时，找到只有USP9X能够与内源适度ALDH1A3并不需要相互作用，从而也许USP9X是控制ALDH1A3稳定适度的除此以外候选物。为了测试这一点，将Flag标识的WT USP9X或合转成失活的互补C1566A USP9X（在合转成结构域的一个不可或缺谷胱甘肽当中运载点性状）转染到HEK293T细胞会当中。 WT USP9X而非C1566A互补的传达以血糖依赖适度方式将增加ALDH1A3蛋白水平，声称USP9X以具体来说其DUB活适度的方式将恒定ALDH1A3。增生母细胞会瘤（GBM）肿瘤细胞会（GSC）的数间充质（MES）亚型代表癌细胞会亚群，其因其整体侵扰适度和对常规制剂的抗适度而闻名。不太可能已明确提出醛脱氢酶1A3（ALDH1A3）作为延续GSC的MES相似性的不可或缺密切相关。然而，支持异常ALDH1A3传达的机制无论如何毫无疑问。在该研究课题当中，研究课题医务人员找到NAD特异适度蛋白酶9X（USP9X）是MES GSC当中ALDH1A3的真正去NAD解构酶。 USP9X与ALDH1A3相互作用，异构解构并稳定解构。此外，研究课题结果清高示FACS分选的USP9Xhi细胞会硫解构物具备高ALDH1A3活适度和有效致瘤技能的MES GSC。USP9X的耗用除此以外下调ALDH1A3，造成MES GSC的自我系统升级和致瘤技能的归因于，这可以通过ALDH1A3的原发性传达得到很大相对的起死回生。此外，研究课题医务人员还表明USP9X诱发剂WP1130作用于ALDH1A3甲醛并且在MES GSC衍生的移置异种GameCube三维当中清高示出除此以外的疗法功效。另外，USP9X与病症人GBM样品当中的ALDH1A3传达强烈系统性，并且对于具备MES亚组的病人具备病症效益。总的来说，研究课题结果揭示了USP9X作为ALDH1A3蛋白稳定解构的不可或缺去NAD解构酶和GSC定向疗法的潜在靶点。原始出处：Zhengxin Chen，et al.USP9X deubiquitinates ALDH1A3 and maintains mesenchymal identity in glioblastoma stem cells.J Clin Invest.April 8， 2019